Thermo Scientific™ Easy-Titer™ Human IgG (gamma chain) Assay Kit

Diese Kits umfassen Antikörper-sensibilisierte Mikrosphären zur Messung der spezifischen Konzentration von Maus-, Kaninchen- und humanen Antikörpern durch eine einfache und schnelle Mikro-Agglutinationsmethode unter Verwendung von Standard Mikrotiterplatten und einem UV-Vis-Plattenlesegerät (Spektralphotometer). Jedes Kit ist spezifisch für eine bestimmte Immunglobulinart und -klasse und ist im Gegensatz zu Gesamtprotein-Assays in der Lage, spezifisch die Konzentration von Target-Antikörpern in Proben (z. B. Serum, Plasma, Kulturüberstand) zu messen, die weitere Proteine enthalten. Die Kits sind äußerst empfindlich und benötigen nur sehr kleine Probenvolumen. Die Antikörperkonzentration wird aus der Assay-Reaktion (Extinktion) durch den Vergleich mit einer Standardkurve ermittelt, welche mit Verdünnungen bekannter Antikörperproben (separat erhältlich) vorbereitet wird.

Besondere Merkmale:

• Kits für fünf beliebte Zielmoleküle – Auswahl ein spezifischen Kits für eine bestimmte Immunglobulinart und -klasse; keine Kreuzreaktion mit anderen Spezies und Klassen des Zielmolekül-Antikörpers

• Antikörperbasierte Spezifität – zur Messung der Konzentration des Zielantikörpers in einer Probe, nicht nur des Gesamtproteins; es ist nicht erforderlich, den Antikörper aufzureinigen, um seine Konzentration zu beurteilen

• Schneller und einfacher als ELISA – homogenes Assay mit drei Komponenten; Gesamtinkubationszeit von 10 Minuten

• Keine spezielle Ausrüstung erforderlich – verwendet Standard-Vortexmischer, Pipettierer, 96-Well-Mikrotiterplatten, Plattenschüttler und Lesegerät (Messung des Absorptionsvermögens bei 340 nm oder 400 nm)

• Empfindlich – Assay-Bereich (Standardkurve) 8 bis 500 ng/ml; erfordert eine Startprobe von mindestens 300 ng/ml

• Reproduzierbar ‑ Variationskoeffizient unter 5 %; Fehler hängt von Verdünnung und Pipettiertechnik ab

• Standard-Antikörper separat erhältlich – verwenden Sie beliebige Standard-Antikörper mit ordnungsgemäßer Zielidentität und bekannter Konzentration (größer als 10 μg/ml)

Easy-Titer Antibody Assays sind schneller und einfacher als ELISA:

1. Vorbereiten der Kalibratorkonzentrationen (5 bis 500 ng/ml) durch Verdünnen des gereinigten Antikörpers mit dem Verdünnungspuffer des Kits

2. Vorbereiten von Proben durch mindestens 20-fache Verdünnung mit dem Verdünnungspuffer innerhalb des Messbereichs (8 bis 500 ng/ml).

3. Röhrchen mit Mikrokugel-Beads vortexen, um eine homogene Suspension zu gewährleisten.

4. 20 μl der Bead-Suspension und jeweils 20 μl von Probe und Kalibratorkonzentration in Wells einer 96-Well-Mikrotiterplatte pipettieren.

5. Mikrotiterplatte 5 min lang durch kräftiges Mischen inkubieren.

6. 100 μl des Blockierreagenz des Kits hinzufügen.

7. Mikrotiterplatte 5 min lang durch kräftiges Mischen inkubieren.

8. Absorption mit dem Standard-Plattenlesegerät (340 oder 405 nm) messen.

9. Standardkurve aufzeichnen und Proben interpolieren, um die Konzentration zu ermitteln.

Enthält:

Jedes Kit enthält Zielmolekül-spezifische IgG-sensibilisierte Mikrosphären, Verdünnungspuffer und Blockierpuffer