Invitrogen™ CorrectASE™ Enzyme

Das Enzym CorrectASE™ entfernt durch Oligonuceotid-Synthesefehler verursachte Unstimmigkeiten, was zu einer 3–10-fachen Reduzierung von Mutationen in Ihren synthetischen Genen oder Fragmenten führt. Durch die Einführung des Enzyms CorrectASE™ in Ihren Do-it-yourself-Gensynthese-Arbeitsablauf können Sie:

• Reduzieren Sie die Anzahl der Mutationen in Ihrem synthetischen Gen oder Fragment
• Verkürzen Sie Ihre Arbeitszeit durch Screening von nur 2 bis 4 statt 10 bis 16 Klonen pro synthetischem Konstrukt.
• Senken Sie Ihre Kosten durch Sequenzierung von nur 2 bis 4 statt von 10 bis 16 synthetischen Genen.

Verhindern Sie ungewollte Mutationen
Handelsübliche synthetische Oligonukleotide haben eine hohe Fehlerquote während der Synthese, die je nach Quelle bei eins pro 300 bis 1.000 Basen liegt. Diese Fehler führen zu Frameshift (Löschen und Einfügen) und Mismatch-Mutationen während der Gensynthese. Die Inkubation mit dem CorrectASE™-Enzym entfernt beide Mutationstypen.

Der Inkubationsschritt mit dem Enzym CorrectASE™ wird nach der anfänglichen PCR-Zusammenstellung von Oligonukleotiden eingeführt. Das PCR-Produkt wird denaturiert und erneut hydrolysiert, sodass keine Mutationen auftauchen. Das Enzym CorrectASE™ bindet sich an die resultierenden Fehlpaarungen und schneidet beide fehlerhaften 3’-DNA-Stränge ab. Die Exonukleaseaktivität von 3’ bis 5’ des Enzyms entfernt die Fehler. Eine abschließende PCR mit einer Proofreading-Polymerase assembliert dann die korrigierten Fragmente und erhöht so die Wahrscheinlichkeit, Klone mit der richtigen Reihenfolge zu isolieren. Abhängig von der eingehenden Oligonukleotid-Qualität müssen nur 2–4 Klone gescreent werden, im Vergleich zu 10–16 Klone in einem Workflow ohne Korrektur. Durch Einbeziehung des CorrectASE™-Enzyms in Ihren Gensynthese-Arbeitsablauf werden Arbeitszeit und Sequenzierungskosten reduziert.

Nur für Forschungszwecke Nicht für therapeutische oder diagnostische Zwecke an Tieren und Menschen bestimmt.