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Invitrogen™ CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit
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Menge:
1 Kit
Unit Size:
1 Stück
Description
Das CloneMiner™ II Kit zum Erstellen von cDNA-Bibliotheken ist ein CloneMiner™ Kit der zweiten Generation, das den schnellen Aufbau von hochgradig repräsentativen cDNA-Bibliotheken ohne Restriktionsenzym-Klonierung ermöglicht. Diese innovative Technologie zum Erstellen von Bibliotheken kombiniert SuperScript™ III Reverse Transkriptase mit Gateway™ Klonierungstechnologie, was zur Entdeckung bisher nicht erreichbarer Klone in voller Länge führt. Das Kit vermeidet die Verwendung von zeitaufwendigen, ineffizienten Ligationsreaktionen, was die Bibliothekenkonstruktion beschleunigt und eine bessere Darstellung ermöglicht.
Das CloneMiner™ II cDNA-Bibliotheken-Konstruktionskit sorgt für Folgendes:
Hohe Primärtiter
Große durchschnittliche Insertionsgrößen
Höchster Prozentsatz an Genen in voller Länge
Hocheffiziente Klonierung von cDNA auf mehrere Zielvektoren ohne Restriktionsenzymverdau und Ligation
Funktionsweise des CloneMiner™ II Kits:
Hohe Ausbeuten von cDNA mit voller Länge: Das CloneMiner™ II Kit enthält SuperScript™ III für die Erzeugung hoher cDNA-Erträge. SuperScript™ III reverse Transkriptase (RT), eine firmeneigene Mutation von SuperScript™ II RT, ist bei 50 °C aktiv und hat eine Halbwertszeit von 220 Minuten. Es hat auch eine Punktmutation, die die RNase H-Aktivität reduziert, dadurch den RNA-Abbau während der Erststrangsynthese verringert und den Prozentsatz der Gene in voller Länge erhöht.
Gateway™ Klonierungstechnologie vermeidet Restriktionsenzymklonierung: Das Erstellen der Bibliothek wird durch Gateway™ Technologie vermittelt, ein stellenspezifisches Rekombinationssystem, das die Verwendung von Restriktionsenzymen und Ligase beim Klonen eliminiert. Jede cDNA-Insertion wird flankiert von spezifischen att-Rekombinationsstellen (hinzugefügt während der cDNA-Syntheseschritte), die sich mit komplementären att-Standorten in Gateway™ Spendervektoren rekombinieren, um Entry-Klone zu erstellen. Die Entry-Klone werden anschließend mit Gateway™ Expressionsvektoren rekombiniert, um Expressionsklone zu erstellen, wodurch die Verwendung von Restriktionsenzymen und Ligase wirkungsvoll ersetzt wird. Die resultierenden Klone behalten die ursprüngliche Ausrichtung und den ursprünglichen Leserahmen bei, was eine funktionelle Analyse von Genen in voller Länge und ganzer Bibliotheken ermöglicht.
Inwiefern unterscheidet sich dieses Kit vom Original CloneMiner™ Kit?
Das neue Kit enthält ein vereinfachtes Protokoll.
Um hohe cDNA-Ausbeuten zu gewährleisten, wurde die SuperScript™ II Reverse Transkriptase (RT) durch SuperScript™ III Reverse Transkriptase ersetzt.
Um eine Reaktionsvorbereitung mit weniger Pipettierschritten zu ermöglichen, wurde das Gateway™ BP Clonase™ Enzymgemisch durch Gateway™ BP Clonase™ II Enzymgemisch ersetzt, das Enzyme und Puffer in einem einzigen Gemisch enthält.
Das CloneMiner™ II cDNA-Bibliotheken-Konstruktionskit sorgt für Folgendes:
Funktionsweise des CloneMiner™ II Kits:
Inwiefern unterscheidet sich dieses Kit vom Original CloneMiner™ Kit?
Specifications
Specifications
| Produkttyp | Kit zur Bibliotheksvorbereitung |
| Inhalt und Lagerung | Das CloneMiner™ II Kit umfasst SuperScript™ III RT, Gateway™ Vektoren, Reagenzien für die cDNA-Bibliothekenkonstruktion und ElectroMax™ DH10B™ T1-Phagen-resistente kompetente Zellen. Ausführliche Informationen finden Sie in dem Handbuch. ElectroMax™ DH10B™ T1-Phagen-resistente kompetente Zellen werden bei –80 °C gelagert, Fraktioniersäulen mit cDNA-Größe bei +4 °C, alle anderen Kit-Komponenten bei –20 °C. |
| Bakterien- oder Hefenstamm | DH10B |
| Klonierungsmethode | Gateway |
| Endprodukttyp | cDNA-Bibliothek |
| Reverse Transkriptase | SuperScript™ III |
| Vektor | pDONR222 |
| Format | Kit |
| Produktlinie | CloneMiner™ |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | cDNA-Bibliotheken und Bibliotheksaufbau |
| Show More |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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