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Molecular Probes™ Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrieassay-Kit

Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit

Marke: Molecular Probes™ C10633

1037.16 CHF gültig bis 2025-06-30
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Artikelnummer. 15332202

1592.00 CHF / 1 Stück

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Beschreibung

Das Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit ist ein einfacher, stabilerer Assay für die Analyse der DNA-Replikation in proliferierenden Zellen im Vergleich zu herkömmlichen BrdU-Methoden. Neu synthetisierte DNA wird mit dem 488 nm-Laser des Durchflusszytometers analysiert. Die Click-iT™ Plus-Formulierung ist kompatibel mit standardmäßigen Fluorophoren, einschließlich R-PE-und R-PE-Tandems, sowie fluoreszierenden Proteinen.

Multiplex-fähig: kompatibel mit R-PE (und Tandems) und fluoreszierenden Proteinen

Präzise: hervorragende Ergebnisse im Vergleich zu BrdU-Assays

Schnell: Ergebnisse in nur 60 Minuten

Den Leitfaden für alle Click-iT™ EdU und Click-iT™ Plus EdU-Assays für die Durchflusszytometrie anzeigen.

Multiplex-fähig
Die Click-iT™ Plus Formulierung bietet eine höhere Multiplex-Fähigkeit als die ursprünglichen Click-iT™ EdU Durchflusszytometrie-Assays. Click-iT™ Plus EdU-Assays können in Verbindung mit R-PE- und R-PE-Tandems und fluoreszierenden Proteinen, sowie GFP und mCherry verwendet werden, und das ohne Verlust der Genauigkeit oder Geschwindigkeit der ursprünglichen Click-iT™ EdU-Assays.

Eine fortschrittliche Methode, die Ihnen bessere Ergebnisse liefert als BrdU
Die genaueste Methode der Proliferationsanalyse ist die direkte Messung der DNA-Synthese. Ursprünglich wurde dies mit der Einbindung radioaktiver Nukleoside durchgeführt. Diese Methode wurde durch die Antikörper-basierte Erkennung des Nukleosid-Analogons Bromdesoxyuridin (BrdU) ersetzt. Das Click-iT™ Plus EdU Durchflusszytometrie-Assay ist eine neuartige Alternative zum BrdU-Assay. EdU (5-Ethynyl-2´-Deoxyuridin) ist ein Thymidin-Analogon und wird während der aktiven DNA-Synthese in die DNA eingebunden. Die Erkennung beruht auf Klick-Chemie, einer Kupfer-katalysierten kovalenten Reaktion zwischen einem Azid und einem Alkin. In dieser Anwendung befindet sich das Alkin auf der Ethynylverbindung der EdU, während das Azid mit dem Alexa Fluor™ Farbstoff gekoppelt ist. Standardmethoden der Durchflusszytometrie werden zur Bestimmung des prozentualen Anteils der S-Phase-Zellen in der Population verwendet.

Milde Bedingungen erlauben die Verwendung mit Zellzyklus-Farbstoffen und Antikörpern
Die geringe Größe des Farbstoff-Azids ermöglicht den effizienten Nachweis der einbezogenen EdU unter milden Bedingungen, während die standardmäßige Aldehyd-basierte Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das Click-iT™ Plus Detektionsreagenz ausreichend ist, um Zugang zur DNA zu erhalten. Dies steht im Gegensatz zu BrdU-Assays, die eine Denaturierung der DNA (mit HCI, Wärme oder Verdauung mit DNase) zur Exposition des BrdU erfordern, so dass es mit einem anti-BrdU-Antikörper nachgewiesen werden kann. Probenverarbeitung für das BrdU-Assay kann zu Signalveränderungen in der Zellzyklus-Verteilung sowie Zerstörung der Antigenerkennungsstellen führen, wenn die HCl-Methode verwendet wird. Im Gegensatz dazu ist das anwenderfreundliche Click-iT™ Plus EdU-Assay mit Zellzyklus-Farbstoffen kompatibel. Das Click-iT™ Plus EdU-Assay kann auch mit Antikörpern gegen Oberflächen- und intrazelluläre Marker sowie mit Standard-Fluorophoren markierten Konjugaten, einschließlich R-PE, R-PE Tandems und fluoreszierenden Proteinen (GFP und mCherry), multipliziert werden.

Schnelles und einfaches Protokoll
Das Click-iT™ Plus EdU-Protokoll basiert auf den Schritten zur Aldehydfixierung und Detergenzipermeabilisierung für die immunhistochemische Antikörpermarkierung. Jedoch ist EdU mit anderen Fixierungs-/Permeabilisierungswirkstoffen, einschließlich Saponin und Methanol, kompatibel. Nur fünf Arbeitsgänge sind zur Vorbereitung Ihrer Zellproliferationsdaten-Analyse erforderlich:

1. Behandlung von Zellen mit EdU.
2. Fixieren und Permeabilisieren von Zellen.
3. Nachweis von S-Phase-Zellen mit Click-iT™ Plus Nachweis-Cocktail für die Dauer von 30 Minuten.
4. Einmal waschen.
5. Analysieren.

Ergebnisse stehen unter bestimmten Umständen bereits nach 60 Minuten zur Verfügung, wir empfehlen jedoch 90 Minuten für alle Anwendungen.

Spezifikation

Inhalt und Lagerung	Enthält EdU (5-Ethynyl-2‘-Deoxyuridin), Alexa Fluor™ 488 Picolylazid, wasserfreies DMSO, Click-iT™ Fixiermittel, Click-iT™ saponin-basierten Permeabilisierungs- und Waschpuffer, Kupferschutzmittel und Click-iT™ EdU-Pufferadditiv. Bei 2 bis 8 °C lagern Mit Trockenmittel und vor Licht geschützt lagern.
Zur Verwendung mit (Geräte)	Durchflusszytometer
Farbstofftyp	Alexa Fluor™ 488
Format	Röhrchen
Produktlinie	Click-iT™
Versandbedingung	Raumtemperatur

Nachweisverfahren	Fluoreszent
Produkttyp	Durchflusszytometrie-Assaykit
Emission	488
Umweltfreundliche Eigenschaften	Weniger gefährlich
Menge	100 assays

Produktvorschläge Dokumentation

Dokumentation

Scientific Resources

Posters

Copper safe Click-iT Plus EdU proliferation assay: Improved compatibility with simultaneous phycobil DateigrößeVersion: 189.2 kB

Zertifikate

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Chargennummer

5 Ergebnisse gefunden

Chargennummer	Art des Zertifikats	Datum	Catalog Number
Chargennummer3061776	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum23/12/2024	Catalog NumberC10633
Chargennummer3026193	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum08/10/2024	Catalog NumberC10633
Chargennummer2820937	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum02/04/2024	Catalog NumberC10633
Chargennummer2521018	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum20/03/2024	Catalog NumberC10633
Chargennummer2752707	Art des ZertifikatsAnalysenzertifikat	Datum13/10/2023	Catalog NumberC10633

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Molecular Probes™ Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrieassay-Kit > 100 Assays

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