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Molecular Probes™ Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrieassay-Kit
Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit
Marke: Molecular Probes™ C10632
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Beschreibung
Das Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrie-Assay-Kit ist ein einfacher, stabilerer Assay für die Analyse der DNA-Replikation in proliferierenden Zellen im Vergleich zu herkömmlichen BrdU-Methoden. Neu synthetisierte DNA wird mit dem 488 nm-Laser des Durchflusszytometers analysiert. Die Click-iT™ Plus-Formulierung ist kompatibel mit standardmäßigen Fluorophoren, einschließlich R-PE-und R-PE-Tandems, sowie fluoreszierenden Proteinen.Den Leitfaden für alle Click-iT™ EdU und Click-iT™ Plus EdU-Assays für die Durchflusszytometrie anzeigen.
Multiplex-fähig
Die Click-iT™ Plus Formulierung bietet eine höhere Multiplex-Fähigkeit als die ursprünglichen Click-iT™ EdU Durchflusszytometrie-Assays. Click-iT™ Plus EdU-Assays können in Verbindung mit R-PE- und R-PE-Tandems und fluoreszierenden Proteinen, sowie GFP und mCherry verwendet werden, und das ohne Verlust der Genauigkeit oder Geschwindigkeit der ursprünglichen Click-iT™ EdU-Assays.
Eine fortschrittliche Methode, die Ihnen bessere Ergebnisse liefert als BrdU
Die genaueste Methode der Proliferationsanalyse ist die direkte Messung der DNA-Synthese. Ursprünglich wurde dies mit der Einbindung radioaktiver Nukleoside durchgeführt. Diese Methode wurde durch die Antikörper-basierte Erkennung des Nukleosid-Analogons Bromdesoxyuridin (BrdU) ersetzt. Das Click-iT™ Plus EdU Durchflusszytometrie-Assay ist eine neuartige Alternative zum BrdU-Assay. EdU (5-Ethynyl-2´-Deoxyuridin) ist ein Thymidin-Analogon und wird während der aktiven DNA-Synthese in die DNA eingebunden. Die Erkennung beruht auf Klick-Chemie, einer Kupfer-katalysierten kovalenten Reaktion zwischen einem Azid und einem Alkin. In dieser Anwendung befindet sich das Alkin auf der Ethynylverbindung der EdU, während das Azid mit dem Alexa Fluor™ Farbstoff gekoppelt ist. Standardmethoden der Durchflusszytometrie werden zur Bestimmung des prozentualen Anteils der S-Phase-Zellen in der Population verwendet.
Milde Bedingungen erlauben die Verwendung mit Zellzyklus-Farbstoffen und Antikörpern
Die geringe Größe des Farbstoff-Azids ermöglicht den effizienten Nachweis der einbezogenen EdU unter milden Bedingungen, während die standardmäßige Aldehyd-basierte Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das Click-iT™ Plus Detektionsreagenz ausreichend ist, um Zugang zur DNA zu erhalten. Dies steht im Gegensatz zu BrdU-Assays, die eine Denaturierung der DNA (mit HCI, Wärme oder Verdauung mit DNase) zur Exposition des BrdU erfordern, so dass es mit einem anti-BrdU-Antikörper nachgewiesen werden kann. Probenverarbeitung für das BrdU-Assay kann zu Signalveränderungen in der Zellzyklus-Verteilung sowie Zerstörung der Antigenerkennungsstellen führen, wenn die HCl-Methode verwendet wird. Im Gegensatz dazu ist das anwenderfreundliche Click-iT™ Plus EdU-Assay mit Zellzyklus-Farbstoffen kompatibel. Das Click-iT™ Plus EdU-Assay kann auch mit Antikörpern gegen Oberflächen- und intrazelluläre Marker sowie mit Standard-Fluorophoren markierten Konjugaten, einschließlich R-PE, R-PE Tandems und fluoreszierenden Proteinen (GFP und mCherry), multipliziert werden.
Schnelles und einfaches Protokoll
Das Click-iT™ Plus EdU-Protokoll basiert auf den Schritten zur Aldehydfixierung und Detergenzipermeabilisierung für die immunhistochemische Antikörpermarkierung. Jedoch ist EdU mit anderen Fixierungs-/Permeabilisierungswirkstoffen, einschließlich Saponin und Methanol, kompatibel. Nur fünf Arbeitsgänge sind zur Vorbereitung Ihrer Zellproliferationsdaten-Analyse erforderlich:
1. Behandlung von Zellen mit EdU.
2. Fixieren und Permeabilisieren von Zellen.
3. Nachweis von S-Phase-Zellen mit Click-iT™ Plus Nachweis-Cocktail für die Dauer von 30 Minuten.
4. Einmal waschen.
5. Analysieren.
Ergebnisse stehen unter bestimmten Umständen bereits nach 60 Minuten zur Verfügung, wir empfehlen jedoch 90 Minuten für alle Anwendungen.
Spezifikation
| Enthält EdU (5-Ethynyl-2‘-Deoxyuridin), Alexa Fluor™ 488 Picolylazid, wasserfreies Dimethylsulfoxid (DMSO), Click-iT™ Fixiermittel, Click-iT™ Saponin-basierte Permeabilisierung und Waschpuffer, Kupferschutzmittel und Click-iT™ EdU Pufferadditiv. |
|
| Durchflusszytometer | |
| Alexa Fluor™ 488 | |
| Röhrchen | |
| Click-iT™ | |
| Raumtemperatur |
| Fluoreszent | |
| Durchflusszytometrie-Assaykit | |
| 488 | |
| Weniger gefährlich | |
| 50 assays |
Sicherheit und Handhabung
Produktidentifikator
Signalwort
Gefahrenkategorie
Gefahrenhinweis
Sicherheitshinweis
Ergänzende Informationen
- Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 488 Flow Cytometry Assay Kit
Signalwort
- Gefahr
Gefahrenkategorie
- LANGFRISTIG GEWÄSSERGEFÄHRDEND Chronisch 2
- Karzinogenität Kategorie 1
- Schwere Augenschädigung/Augenreizung Kategorie 1
- Keimzellmutagenität Kategorie 1B
- Keimzellmutagenität Kategorie 2
- Reproduktionstoxizität Kategorie 2
- Sensibilisierung der Haut Kategorie 1
- Spezifische Zielorgan-Toxizität bei wiederholter Exposition Kategorie 2
Gefahrenhinweis
- H317-Kann allergische Hautreaktionen verursachen.
- H318-Verursacht schwere Augenschäden.
- H340-Kann genetische Defekte verursachen.
- H341-Kann vermutlich genetische Defekte verursachen.
- H350-Kann Krebs erzeugen.
- H361-Kann vermutlich die Fruchtbarkeit beeinträchtigen oder das Kind im Mutterleib schädigen.
- H371-Kann die Organe schädigen.
- H412-Schädlich für Wasserorganismen, mit langfristiger Wirkung.
Sicherheitshinweis
- P201-Vor Gebrauch besondere Anweisungen einholen.
- P202-Vor Gebrauch alle Sicherheitshinweise lesen und verstehen.
- P261-Einatmen von Staub/Rauch/Gas/Nebel/Dampf/Aerosol vermei den.
- P264-Nach Gebrauch gründlich waschen.
- P270-Bei Gebrauch nicht essen, trinken oder rauchen.
- P273-Freisetzung in die Umwelt vermeiden.
- P280-Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichtsschutz tragen.
- P302+P352-BEI BERÜHRUNG MIT DER HAUT: Mit viel Wasser/waschen.
- P305+P351+P338-BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN: Einige Minuten lang behutsam mit Wasser spülen. Vorhandene Kontaktlinsen nach Möglichkeit entfernen. Weiter spülen.
- P308+P313-BEI Exposition oder falls betroffen: Ärztlichen Rat einholen/ärztliche Hilfe hinzuziehen.
- P310-Sofort GIFTINFORMATIONSZENTRUM/Arzt/anrufen.
- P332+P313-Bei Hautreizung: Ärztlichen Rat einholen/ärztliche Hilfe hinzuziehen.
- P391-Verschüttete Mengen aufnehmen.
- P501b-Inhalt/Behälter gemäß den örtlichen/regionalen/nationalen/internationalen Vorschriften zuführen.
Ergänzende Informationen
- MIXTURE LIST-Enthält: 5-ethynyl-2idine, Paraformaldehyde, Sulfuric acid,copper(2+) salt
Berichtigung von Produktinhalten
Bitte geben Sie uns Ihr Feedback zu den Produktinhalten, indem Sie das folgende Formular ausfüllen.
Name des Produkts
Molecular Probes™ Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Durchflusszytometrieassay-Kit > 50 Assays
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
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