Invitrogen™ Stabilized Blood-to-C_T™ Nucleic Acid Preparation Kit for qPCR, compatible with Tempus™ Blood RNA Tubes

Beschreibung

Zur Verwendung mit 1-Step und 2-Step qRT-PCR

Das Stabilized Blood-to-C_T Nukleinsäure-Vorbereitungskit für qPCR ermöglicht die Durchführung einer Expressionsanalyse direkt aus 500 μl Aliquot humanen Vollbluts, das in Tempus Blood RNA Röhrchen ohne konventionelle RNA-Reinigung entnommen wurde. Dieses einfache Verfahren erzeugt ein Lysat, das direkt in die reverse Transkription und die Echtzeit-PCR mit der Empfindlichkeit und Spezifität wechseln kann, die konventionell gereinigter RNA entspricht. Dieses Kit spart Zeit, erzeugt weniger Abfall und überzeugt durch einen einfachen Arbeitsablauf, der für geringere Probenmengen geeignet ist, sich aber auch problemlos in automatisierte Anwendungen mit hohem Durchsatz integrieren lässt.

• Nachweis der Gesamt-RNA (einschließlich miRNA) aus Tempus™ Blood RNA-Röhrchen ohne Aufreinigung
• Robust: 500 μl bei Raumtemperatur verarbeitete Probe mit Ergebnissen äquivalent zu denen aus aufgereinigter RNA
• Flexibles Format: Proben können in Mikrozentrifugenröhrchen oder manuellen/automatisierten 96-Well-Mikrotiterplatten vorbereitet werden

Einfacher Arbeitsablauf ohne Einbußen bei der Empfindlichkeit und Spezifität
Der Prozess beinhaltet das Pelletieren und Waschen eines 500 µl-Aliquots aus dem Blutentnahmeröhrchen, gefolgt von einem einzigartigen Verdau-/DNase-Schritt, bei dem die Integrität der RNA erhalten bleibt. Die Zubereitung erfolgt vollständig bei Raumtemperatur, im Gegensatz zu anderen Produkten, die temperaturspezifische Inkubationsschritte erfordern. Bis zu 96 Proben können in der Hälfte der Zeit vorbereitet werden, die für eine wettbewerbsfähige Zentrifugensäulen-Aufreinigung erforderlich ist, um nur 12 Proben zu verarbeiten, und dabei gibt es weniger Arbeitsaufwand. Das resultierende Lysat kann zur späteren Verwendung gelagert werden (1 Stunde bei 4 °C oder 5 Monate eingefroren). Dieses einfache Verfahren findet in dem gleichen Probenverarbeitungs-Well von Anfang bis Ende statt, d. h. es erfolgt keine Probenübertragung. Die aus dem Lysat generierten Echtzeit-PCR-Daten entsprechen den Ergebnissen aus konventionell gereinigter RNA aus denselben Röhrchen und wurden mit den folgenden qPCR-Reagenzien validiert:
• Applied Biosystems™ High Capacity RNA-to-cDNA™ Kit und TaqMan™ Gene Expression Master Mix
• Invitrogen SuperScript™ VILO™ cDNA Synthesis Kit und TaqMan Gene Expression Master Mix
• Applied Biosystems™ TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Kit und TaqMan Universal Master Mix II
• Applied Biosystems™ TaqMan™ One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit
Reverse-Transkription-Reagenzien für cDNA-Synthese, TaqMan Mastermixe und TaqMan Assays für Echtzeit-PCR-Analyse sind separat erhältlich und nicht im Kit enthalten.

Die Gesamtzahl der Reverse Transkription- und PCR-Reaktionen, die von einer Ausgangsprobe möglich sind, hängt von den Mindestanforderungen an die Proben der gewünschten RT-PCR-Kits ab (Einzelheiten finden Sie in der Anwenderdokumentation).

Screening, Entdeckung oder Validierung
Für Anwender, die spezifische Gene untersuchen möchten, wurde das Stabilized Blood-to-C_T™ Nukleinsäure-Vorbereitungskit für qPCR entwickelt, das ein schnelles Screening aus einer kleinen Menge einer Ausgangsprobe (ca. 5 % des Gesamtvolumens eines ordnungsgemäß gefüllten Tempus Blood RNA-Röhrchens pro Probe) ermöglicht. Verbleibende Probe im Blutentnahmeröhrchen kann für den späteren Gebrauch archiviert oder nach Bedarf aufgereinigt werden.

Wer Entdeckungs- oder Validierungsversuche mit Echtzeit-PCR-Analyse durchführen möchte, spart mit dem Stabilized Blood-to-C_T Nukleinsäure-Vorbereitungskit für qPCR Aufwand, Zeit und Gesamtkosten. Gleichzeitig bietet es einen skalierbaren Prozess, mit dem Labore, die durch herkömmliche Aufreinigungsverfahren Engpässe erlebten, ihre Proben nun mühelos verarbeiten können.

miRNA-Analyse
Angesichts des zunehmenden Fokus auf nicht-codierender RNA und ihrer steuernden Funktion bei der Entwicklung von Krankheiten ist es beruhigend zu wissen, dass diese kleinen und doch so wichtigen RNA-Moleküle mit dem Stabilized Blood-to-C_T Nukleinsäure-Vorbereitungskit für qPCR zuverlässig erkannt werden können. Unsere Wissenschaftler haben das Lysat mit dem Applied Biosystems TaqMan MicroRNA Kit zur reversen Transkription und TaqMan Universal Master Mix II gegen eine große Auswahl an TaqMan™ MicroRNA-Assays getestet und Ergebnisse erzielt, die gleich oder besser sind als die des führenden miRNA-Aufreinigungsprodukts des Wettbewerbers.

Mehr Umweltfreundlichkeit & Weniger Abfall = Höhere Ersparnis
Das Stabilized Blood-to-C_T Nukleinsäure-Vorbereitungskit für qPCR vereinfacht Arbeitsabläufe und reduziert den Plastikmüll um 75 % (nach Gewicht) gegenüber einer vergleichbaren Anzahl von Proben, die durch Säulen verarbeitet werden, und erzeugt keinen organischen Abfall. Platzsparende Stellfläche maximiert die Kapazität des Gefriergeräts.
Für Anwender, die keine vollständige Reinigung benötigen: Wenn die herkömmliche RNA-Reinigung für das Restblutröhrchen weiterhin erforderlich ist, verwenden Sie das MagMAX RNA-Isolierungskit für stabilisierte Blutentnahmeröhrchen. Dieses Kit maximiert den Ertrag der Gesamt-RNA aus Tempus Blood RNA-Röhrchen mit Hilfe eines auf magnetischen Beads basierenden Trennverfahrens.
Technische Daten:
• Kompatibilität: Tempus Blood RNA-Röhrchen
• Verarbeitungszeit: Unter einer Stunde
• Format: Mikrozentrifugenröhrchen, 96-Well-Platten
• Anzahl Preps: 200 Reaktionen

• Geringerer Ressourcenverbrauch, weniger gefährlich, weniger Abfall

Blutröhrchen, Reverse Transkriptionsreagenzien für die cDNA-Synthese und TaqMan™ Mastergemische für die Echtzeit-PCR-Analyse separat erhältlich.

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