Invitrogen™ Retic Lysate IVT™ Kit

Beschreibung

Das Retic Lysat IVT™ Kit übersetzt effizient in vitro-synthetisierte Transkripte, Poly(A)-RNA und Gesamt-RNA, einschließlich schwer zu übersetzender RNAs. Das optimierte Lysat führt zu hoher Proteinausbeute, biologischer Aktivität und konsistenter Leistung. Ein Bericht in Nucleic Acids Research (1) stellte fest, dass einige kommerzielle Retikulozyten-Lysate eine schlechte Wiedergabetreue für die Initiierung beim entsprechenden AUG-Initiator Codon hatten. Das Retic Lysat IVT-Kit wurde mit Kozaks Konstrukten getestet und zeigte eine hohe Wiedergabetreue für die Initiierung am richtigen AUG.

• Effiziente Translation einer Vielzahl von Proteinen mit hohem Molekulargewicht und mRNA mit und ohne Cap-Struktur
• Für ein großes Volumen an Vorlagen-mRNA

So funktioniert es
Das Lysat wurde für die Translation optimiert, indem ein ATP-regenerierendes System, ein Hämin und eine tRNA der Kalbsleber hinzugefügt wurden. Im Kit ist ein optimierter Translations-Mix (-Met oder -Leu) für die Translation von Nachrichten mit und ohne Cap-Struktur zusammen mit Puffern mit hohem und niedrigem Salzgehalt enthalten. Diese Puffer können zur Maximierung der Proteinausbeute und -aktivität von Sequenzen mit schwieriger Translation verwendet werden.

1. Kozak, M. (1990) Evaluation of the fidelity of initiation of translation in reticulocyte lysates from commercial sources. Nucleic Acids Res 18:2828.