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Invitrogen™ GLOBINclear™-Human Kit, for globin mRNA depletion
Beschreibung
Includes
20 μl Capture Oligo-Gemsich; 600μl Streptavidin-Magnetbeads; 1,5 ml 2x-Hybridisierungspuffer; 1,5 ml Streptavidin-Bead-Puffer; 1,75 nukleasefreies Wasser; 200 μl RNA-Bindungsbeads; 5 ml RNA-Waschlösungskonzentrat; 1 ml Elutionspuffer; 80 μl RNA-Beadpuffer; 4 ml RNA-Bindungspufferkonzentrat; 100 1,5 ml-Antihaftröhrchen
Benötigt
Das Kit muss mit einem magnetischen Stativ verwendet werden. Der Magnetständer für sechs Röhrchen (Kat.-Nr. AM10055) kann sechs separate konische 1,5 ml-Mikrozentrifugenröhrchen oder 2 ml-Mikroröhrchen mit rundem Boden und einem Durchmesser von 8 bis 10 mm aufnehmen.
Das GLOBINclear-Human-Kit ist eine schnelle und robuste Behandlung von RNA, die aus menschlichem Vollblut gewonnen wird, und sie nutzt eine neuartige, nicht enzymatische Technologie, um > 95 % der Alpha- und Beta-Globin-mRNA aus Gesamt-RNA-Präparaten schnell zu entfernen.
Das GLOBINclear-Human-Kit bietet folgende Vorteile:
Verbessert die Qualität und Genauigkeit der Genexpressionsprofilierung, indem > 95 % der unerwünschten Globin-mRNA aus der Gesamt-RNA des Vollblut entfernt werden, um biologisch relevante Daten zu erhalten
• Vermeidet aggressive RNase-H-Behandlungen, die mRNA abbauen und Expressionsprofile verändern können
• Bietet eine überlegene Vorlage für Sequenzierung der nächsten Generation, RNA-Amplifikationsreaktionen, cDNA-Synthese, Mikroarray-Analyse und routinemäßige quantitative RT-PCR mit einer nicht-enzymatischen Technologie
Das Entfernen von Globin-mRNA ist ein wichtiger vorbereitender Schritt
Transkriptom-Expressionsprofilierung von Vollblutproben wird häufig zur Untersuchung physiologischer, pathogener und therapeutischer Reaktionen des Transkriptoms verwendet. Bis zu 70 % der mRNA (nach Masse) in Vollblut-Gesamt-RNA-Proben bestehen jedoch aus unerwünschten Globin-Transkripten, die die Qualität und Genauigkeit der Genexpressionsprofilierung in DNA-Mikroarray- und Sequenzierungstechnologien beeinflussen. Daher ist der Abbau von Globin-mRNA ein wichtiger Vorbereitungsschritt, um während der Transkriptomanalyse genaue und biologisch relevante Daten zu erhalten.
Der Vorteil von GLOBINclear
Das GLOBINclear Kit verwendet eine neuartige Hybridisierungstechnologie, die die Stärke der Biotin-Streptavidin-Bindung, die Spezifität der Nukleinsäure-Hybridisierung und den praktischen Nutzen magnetischer Trennungen nutzt. Zuerst wird die Globin-mRNA mit einer neuartigen Hybridisierungsauffangtechnologie aus der Vollblut-RNA entfernt; dann wird die verbleibende RNA mit einem schnellen, magnetischen Bead-basierten Reinigungsverfahren weiter gereinigt.
Als Ergebnis liefert die von GLOBINclear verarbeitete RNA empfindlichere Expressionsprofilergebnisse als unverarbeitete Vollblut-RNA, da das Abbauverfahren Probleme im Zusammenhang mit der reichlich vorhandenen Globin-mRNA, die in Vollblut-RNA-Proben gefunden wird, mindert.
Darüber hinaus nutzen andere Globin-mRNA-Abbautechnologien aggressive enzymatische RNase H-Behandlungen, die das Expressionsprofil durch Abbau anderer mRNAs als Globin-mRNA beeinträchtigen können. Da das GLOBINclear-Kit eine nicht-enzymatische Technologie verwendet, ist die resultierende RNA eine überlegene Vorlage für Sequenzierung der nächsten Generation, RNA-Amplifikationsreaktionen, cDNA-Synthese, Mikroarray-Analyse und routinemäßige quantitative RT-PCR.
Zubehörprodukt
Das Kit erfordert die Verwendung eines magnetischen Stativs. Der DynaMag-2 Magnetständer (Kat.-Nr. Nr. 12321D) wird empfohlen.
Bestellinformation
Versandbedingung: Zugelassen für den Versand auf Nass- oder Trockeneis
Spezifikation
Spezifikation
| Produkttyp | mRNA-Depletionskit |
| Inhalt und Lagerung | • 20 µl Capture-Oligo-Gemisch (-20 °C) • 600 µl Streptavidin Magnetische Beads (4 °C—nicht einfrieren) • 1,5 ml 2X Hybridisierungspuffer (Raumtemperatur) • 1,5 ml Streptavidin Bead-Puffer (Raumtemperatur) • 1,75 nukleasefreies Wasser (-20 °C, 4 °C oder Raumtemperatur) • 200 µl RNA Bindungs-Beads (4 °C—nicht einfrieren) • 5 ml RNA-Waschlösungskonzentrat (4 °C oder Raumtemperatur) • 1 ml Elutionspuffer (4 °C oder Raumtemperatur) • 80 µl RNA-Bead-Puffer (Raumtemperatur) • 4 ml RNA-Bindungspuffer-Konzentrat (Raumtemperatur) • 100 1,5 ml Antihaftröhrchen (Raumtemperatur) Alle auf nassem Eis ausgelieferten Komponenten außer Capture-Oligo-Gemisch (Trockeneis). |
| Endprodukttyp | Gesamt-RNA (Globin mRNA-arm) |
| Hochdurchsatz-Kompatibilität | Geeignet für hohe Durchsätze |
| Probentyp | Gesamt-RNA (Vollblut) |
| Spezies | Human |
| Format | Mikroröhrchen |
| Produktlinie | Ambion™, GLOBINclear™ |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Microarray-Analyse, quantitative Echtzeit-PCR (qPCR), Reverse-Transkriptase-PCR (RT-PCR), Northern Blotting, cDNA-Bibliothekserstellung |
| Menge | 20 Aufreinigungen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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