Invitrogen™ Ambion™ DNase I (RNase-frei)

DNase I funktioniert durch Hydrolyse von Phosphodiesterverbindungen, wodurch Mono- und Oligonukleotide mit der 5'-Phosphat- und 3'-Hydroxylgruppe erzeugt werden. RNase-freie DNase I wird empfohlen, um DNA in Gegenwart von RNA abzubauen. Ohne RNase ist muss die Integrität von RNA erhalten bleiben. So wird DNase I zum Beispiel häufig zum Entfernen von Template-DNA nach einer In-vitro-Transkription sowie zum Entfernen kontaminierender DNA in Gesamt-RNA-Proben (insbesondere aus transfizierten Zellen, die Plasmid-DNA enthalten können) verwendet, die für Ribonuklease-Protection-Assays, für Verkürzungen von cDNA-Bibliotheken und für die RT-PCR eingesetzt werden.

• Untersucht auf kontaminierende RNase- und Protease-Aktivität
• Die Funktionalität wird durch Aufspaltung humaner genomischer DNA, gefolgt von einer quantitativen Echtzeit-PCR zum Nachweis nicht aufgespaltener DNA bestimmt
• Erfordert zum Erzielen einer maximalen Aktivität zweiwertige Kationen (Mg²⁺ und Ca²⁺ bei jeweils ca. 5 mmol und 0,5 mmol) und hat einen optimalen pH-Wert von 7,8.
• Einheiten-Definition: Eine Einheit ist die zum vollständigen Abbau von 1 μg DNA in 10 min bei 37 °C erforderliche Enzymmenge und entspricht 0,04 Kunitz-Einheiten

Als Alternative zu Rinder-DNase I dient rekombinante DNase I (Bestellnr. Nr. AM2235). Eine aktivere, salztolerante DNase finden Sie bei den TURBO™ DNase-Produkten (Bestellnr. Nr. AM2239 und AM2238).

PCR & Echtzeit-PCR, Echtzeit-PCR (qPCR), reverse Transkription