Häufige Fragen zu Zentrifugen-Filtereinheiten
Wie finde ich den richtigen MWCO-Filter?
Für Proteine wird ein MWCO-Wert empfohlen, der drei- bis sechsmal kleiner ist als das Molekulargewicht des gelösten Stoffes, der zurückgehalten werden soll. Wenn die Durchflussrate eine Rolle spielt, wählen Sie eine Membran mit einem MWCO am unteren Ende dieses Bereichs (3X); wenn das Hauptaugenmerk auf der Zurückhaltung liegt, wählen Sie eine dichtere Membran (6X). Die einzelnen Hersteller verwenden unterschiedliche Moleküle zur Definition des MWCO ihrer Membranen, daher ist es wichtig, anhand von Pilotexperimenten die Leistung der Membran in einer bestimmten Anwendung zu überprüfen.
Sind MWCO-Zentrifugenfilter wiederverwendbar?
Die Wiederverwendung von MWCO-Filtern ist möglich, wenn auch nicht ideal. Voraussetzung ist, dass die Filter nicht verstopft sind und das korrekte Reinigungsprotokoll eingehalten wurde. Wenn es zu einem drastischen Eiweißverlust kommt oder das Konzentrieren unerwartet lange dauert, ist der Filter verstopft. Unabhängig davon sollten die Filter spätestens nach dreimaliger Verwendung entsorgt werden. Diese Filter können nach 2–3-maligem Gebrauch undicht werden.
Wie finde ich die richtige Zentrifuge für den jeweiligen Filter?
Wenn Sie den richtigen Rotor und die richtigen Adapter für Ihre gefilterten Röhrchen verwenden, sollte sie die für Ihr Filtrationsprotokoll erforderliche G-Kraft aushalten können.
Was versteht man unter der „Reverse-Spin-Methode“ und wie wird sie durchgeführt
Um die gesamte konzentrierte Probe zu erhalten, ohne eine Pipette zu verwenden, können Sie Ihren Konzentrator umdrehen. Dazu wird der Konzentrator in ein Sammelröhrchen gestürzt und erneut zentrifugiert, um alle Tropfen der Probe zu erhalten. Diese Technik eignet sich hervorragend für schwer konzentrierbare Proben oder für Proben, die auf weniger als 50 µl konzentriert sind.